Edición de «Manipulación de semen en ART»

== El esperma ==
El semen está compuesto de '''esperma''' y '''plasma seminal'''. 

Los espermatozoides se producen y desarrollan en los testículos, durante un proceso que se llama '''espermatogénesis''', bajo el influjo de unas hormonas: '''testosterona''' y '''hormona''' '''estimulante''' del '''folículo'''.  

== Técnicas de Reproducción Asistida (ART) ==
{{AP|Fecundación artificial}}

Se caracterizan por la aplicación de una serie de procedimientos de '''manipulación controlada''' de gametos (óvulos y espermatozoides) y/o embriones, necesarios para llevar a cabo la Inseminación Artificial Intrauterina o la Fertilización in Vitro.

El '''protocolo de preparación de esperma''', es un '''requisito previo''' para la realización de cualquier ART, incluida la IA. El '''procesamiento''' adecuado de una muestra de esperma, '''influye en la capacidad de fertilización de los espermatozoides''', tanto in vivo como in vitro, y es fundamental para el éxito de cualquier ART<ref name=":0">{{Cita publicación|url=https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10819443/|título=Sperm Preparation Methods|apellidos=Mortimer|nombre=David|fecha=2000|publicación=Journal andrology|fechaacceso=23 de junio de 2020|doi=|pmid=10819443|volumen=21|número=3}}</ref>. [[Archivo:Inseminacion-artificial.png|miniaturadeimagen|Inseminación Artificial utilizando una cánula con muestra de semen. ]]

==== 1. Inseminación Artificial (IA) ====
La IA consiste en depositar con una cánula una '''muestra de semen dentro del útero de la mujer''' en el momento de la ovulación.  

La IA puede hacerse con '''semen''' de la '''pareja''' o de '''donante'''.
* Si los espermatozoides proceden de la pareja, se habla de Inseminación Artificial '''Homóloga''' (AIH).
* Si proceden de un donante, se habla de Inseminación Artificial de Donante (AID), o también de inseminación '''Heteróloga'''  

==== 2. La Fecundación in vitro (FIV) ====
[[Archivo:IA.gif|miniaturadeimagen|Momento en el cual se realiza la fecundación de un óvulo mediante la técnica ICSI ]]
La FIV consiste en '''unir el óvulo con los espermatozoides en el laboratorio''' para facilitar que éste sea fecundado y así producir un embrión, que posteriormente será transferido al útero materno. Consta de distintas fases: 
* Estimulación del ovario con fármacos.
* Extracción de los óvulos mediante una punción que se realiza a través de la vagina y bajo sedación superficial.
* Fecundación de los óvulos en el laboratorio.
* Desarrollo de los embriones en incubadoras.
* Transferencia del embrión dentro del útero.  
Existe una '''variante de la FIV''' convencional conocida como '''[[ICSI|Inyección Intracitoplasmática de Espermatozoides (ICSI]])''' que consiste en '''inyectar''' un '''espermatozoide directamente''' dentro del óvulo. 

En función del '''lugar''' en el que se '''transfieren los gametos''', se distinguen una gran variedad de técnicas: ''IVC (Intravaginal Culture), DIFI (Direct Intrafollicular Insemination), GIFT (Gametes Intrafallopian Transfer), GIPT (Gametes Intraperitoneal Transfer), GIUT or DIRGAT (Intrauterine Transfer of Ovum and Sperm), ICI (IntraCervical Insemination), IPI (IntraPeritoneal Insemination), ITI (IntraTubal Insemination), IUI (IntraUterine Insemination), LTOT (Low Tube Ovum Transfer)'' …entre otros 

== Técnicas de selección de esperma en ART ==
Dentro de estas técnicas, hay varios '''procesos comunes''', así como otras variables que dependen de la modalidad elegida.
* Al principio, la muestra de semen se deposita en un tubo y se diluye en un medio de cultivo específico. El tubo se coloca en una pendiente en una incubadora durante un tiempo determinado. La incubadora tiene condiciones específicas de temperatura y composición del aire que determinan el medio tampón particular en el que se diluirá el semen para controlar el pH de la muestra. Después de la incubación, el sobrenadante se aspira, se introduce en un tubo vacío y luego está listo para la inseminación. 
Las tres técnicas de preparación de esperma más frecuentemente utilizadas incluyen:
* '''Técnica de natación (SU)''', con sus variantes:
** Natación Directa (DSU), 
** Natación Convencional (CSU).

* '''Técnicas de Centrifugación en Gradiente de Densidad''' '''(DGC)'''  

* '''Técnicas de Migración-Sedimentación (MS)''' 

=== Técnica de Natación ===
[[Archivo:Capacitación-por-swim-up.png|miniaturadeimagen|Tras añadir un medio nuevo se seleccionan los espermatozoides que han conseguido subir o "nadar" tras 40 minutos en el incubador.<ref name=":1">{{Cita web|url=https://www.reproduccionasistida.org/capacitacion-espermatica/|título=¿En qué consiste la capacitación de los espermatozoides?}}</ref>]]
Se basa principalmente en la '''capacidad de movimiento de los espermatozoides''', más concretamente, en la migración de los espermatozoides de acuerdo con su motilidad.  

Esta estrategia consiste en concentrar la muestra de esperma para '''forzar a los espermatozoides con la mejor movilidad a migrar''' luego de la concentración celular a un medio de cultivo específico, que intenta emular al moco cervical.  

Más tarde, los espermatozoides son '''rescatados e inseminados en el tracto reproductivo femenino''' (ya sea en el útero o directamente en las trompas). 
# Al principio, la '''muestra''' de semen se '''deposita''' en un '''tubo''' y se diluye en un '''medio''' de '''cultivo''' específico. 
# El tubo se coloca en una pendiente, se lleva a una '''incubadora''' '''durante''' un '''tiempo''' determinado. 
# La incubadora tiene '''condiciones''' '''específicas''' de '''temperatura''' y '''composición''' del aire que determinan el medio tampón particular en el que se diluirá el semen para controlar el pH de la muestra. 
# Después de la incubación, el '''sobrenadante se aspira.'''
# Se '''introduce''' en un '''tubo vacío'''.
# Por último, está '''listo''' para la '''inseminación'''.
Esta es la versión más simple de las Técnicas de Natación y generalmente se llama Natación Directa '''(Direct swim up) (DSU)'''. 

Se llama técnica convencional de natación '''Conventional swim‐up (CSU)'''. A los protocolos que llevan a cabo una segunda centrifugación después del proceso de incubación, es decir, centrifugación-incubación-centrifugación, con las preparaciones de muestra correspondientes.  

=== Técnica de Centrifugación en Gradiente de Densidad  ===
[[Archivo:Capacitacion-gradientes-densidad.png|miniaturadeimagen|Se seleccionan aquellos espermatozoides que consiguen atravesar los gradientes. Se realiza en unos 30 minutos.<ref name=":1" />]]
La idea consiste en preparar un tubo con '''dos capas bien diferenciadas''': 
# Una capa en la parte inferior con concentración de '''alta densidad'''.
# Otra capa con '''menor densidad'''. 
Algunos protocolos incuban este tubo con '''capas''' '''separadas''', '''simulando''' la '''temperatura''' del '''cuerpo''' humano.

Esta técnica '''DGC''' consiste en preparar gradientes de densidad que separarán los espermatozoides en función de un equilibrio, por lo que la '''densidad''' de los '''espermatozoides''' es '''igual''' a la de un '''gradiente'''. 
# Después de la centrifugación de una muestra de semen, el plasma seminal flota en el gradiente de baja densidad y los '''espermatozoides''' '''inmaduros''' o '''muertos''' '''flotan''' entre los dos gradientes. 
# Los espermatozoides maduros, que son de '''interés''', son las células compactadas que alcanzan la '''capa de gradiente de mayor densidad''', es decir, la parte inferior del tubo. 
# Estos '''espermatozoides''' '''maduros''' se '''recuperan''' y luego se '''diluyen''' en un medio de preparación de espermatozoides.
# Se centrifugan una vez más.
# El resultante se '''resuspende''' en otro medio y se '''transfiere''' a un tubo o catéter, '''listo''' para la '''inseminación'''.

=== Técnica de Migración – Sedimentación ===
[[Archivo:Capacitación de esperma.png|miniaturadeimagen|En el laboratorio, la duración de este proceso se encuentra entre los 30-60 minutos, dependiendo del tipo de capacitación que se seleccione.<ref name=":1" />]]
Este método se basa en la movilidad del esperma acompañado de la gravedad<ref name=":0" />.
# Consiste en '''depositar''' '''semen''' en un tubo específico. 
# Una vez depositado, el tubo está cubierto por un '''medio''' de '''lavado''' que '''supera''' la '''cámara''' de '''recarga.'''
# Luego se '''incuba'''. 
# Los '''espermatozoides''' '''móviles''' '''migran''', con la ayuda de la '''gravedad''', desde la cámara hasta el fondo del tubo.
# Luego se '''extraen''' y están listos para ser '''inseminados'''. 
También debe tenerse en cuenta que los '''métodos''' '''conjuntos''' a menudo se utilizan para la '''preparación''' del '''semen'''. Una de las combinaciones más populares corresponde a la Centrifugación en Gradiente de Densidad seguida de Técnica de Natación (DGC + SU)<ref name=":1" />.

== Efectos de la manipulación del semen ==
[[Archivo:Manipulación de esperma.jpg|miniaturadeimagen|El impacto de los procesos de manejo de semen fue poco entendido hasta que un estudio posterior del estrés oxidativo lo aclaró<ref>{{Cita publicación|url=https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4026229/|título=Effect of Oxidative Stress on Male Reproduction|apellidos=Agarwal|nombre=Ashok|apellidos2=Virk|nombre2=Gurpriya|fecha=2014|publicación=World J Mens Health|volumen=32|páginas=1 - 17|fechaacceso=23 de junio de 2020|doi=10.5534/wjmh.2014.32.1.1|pmid=24872947|apellidos3=Ong|nombre3=Chloe|apellidos4=du Plessis|nombre4=Stefan S}}</ref>.]]
Por un lado, algunos estudios científicos intentan aclarar los mejores procedimientos para la Inseminación Artificial con respecto a sus tasas de éxito. La conclusión cada vez es definitiva: '''no hay evidencia científica disponible'''<ref>{{Cita publicación|url=https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26930619/|título=Predictive value of sperm morphology and progressively motile sperm count for pregnancy outcomes in intrauterine insemination|apellidos=Lemmens|nombre=L.|fecha=2017|publicación=Fertil Steril|volumen=105|páginas=1462 - 1468|fechaacceso=23 de junio de 2020|doi=10.1016/j.fertnstert.2016.02.012|pmid=26930619}}</ref>'''.'''

Un estudio realizado por Volpes<ref>{{Cita publicación|url=https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26984108/|título=The pellet swing-up is the best technique for sperm preparation during in vitro fertilization procedures.|apellidos=Volpes|nombre=A.|fecha=2016|publicación=J assist reprod genet|volumen=33|páginas=765 - 770|fechaacceso=23 de junio de 2020|doi=10.1007/s10815-016-0696-2|pmid=26984108|apellidos2=Sammartano|nombre2=Francesca|apellidos3=Rizzari|nombre3=Simona|apellidos4=Gull|nombre4=Salvatore|apellidos5=Marino|nombre5=Angelo|enlaceautor=|apellidos6=Allegra|nombre6=Adolfo|número=6}}</ref> muestra, por ejemplo, que '''DSU y DGC + SU''' ofrecen poblaciones de esperma con ADN '''más intacto''' en comparación con PSU y DGC.

Recientemente, otro estudio también ha demostrado que la '''EM''' ofrece poblaciones de '''esperma''' con '''mejor movilidad y concentración''' en comparación con DGC-SU, según Kiratli<ref>{{Cita publicación|url=https://www.researchgate.net/publication/321188117_A_comparative_evaluation_of_migration_sedimentation_method_for_sperm_preparation|título=A comparative evaluation of migration sedimentation method for sperm preparation|apellidos=Kiratli|nombre=Sevil|fecha=Noviembre 2017|publicación=Systems Biology in Reproductive Medicine|volumen=64|páginas=1 - 8|fechaacceso=23 de junio de 2020|doi=10.1080/19396368.2017.1402100|pmid=|apellidos2=Kose|nombre2=Kenan|apellidos3=Yuncu|nombre3=Mehmet|apellidos4=Ozkavukcu|nombre4=Sinan|número=2}}</ref>.

Estos artículos '''no abordan el problema''' planteado por dos razones:
# La recolección de poblaciones de esperma más o menos dañadas no revela si las técnicas mismas dañan el esperma. Las '''diferencias''' encontradas pueden '''deberse''' exclusivamente a la '''capacidad de distinguir entre ellas'''.
# Dichos estudios tienden a usar '''semen espeso''' como un grupo de "control", lo cual es problemático, ya que el semen crudo se ve '''afectado por condiciones adversas''' fuera del tracto femenino.
Varios estudiosos del tema aseguran que el daño oxidativo que resulta de la generación de leucocitos de ROS y los espermatozoides inmaduros adyacentes a los espermatozoides maduros, explica no solo el problema de la disfunción iatrogénica de los espermatozoides, sino también el '''daño real''' que los '''espermatozoides''' pueden '''sufrir durante el manejo y manipulación''' del semen<ref>{{Cita publicación|url=https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23230887/|título=Processes Involved in Assisted Reproduction Technologies Significantly Increase Sperm DNA Fragmentation and Phosphatidylserine Translocation|apellidos=Balasuriya|nombre=A.|fecha=2014|publicación=Andrologia|volumen=42|páginas=86 - 97|fechaacceso=23 de junio de 2020|doi=10.1111/and.12052|pmid=23230887|apellidos2=Serhal|nombre2=P.|apellidos3=Doshi|nombre3=A.|apellidos4=Harper|nombre4=J.C.|año=|número=2}}</ref><ref>{{Cita publicación|url=https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26407101/|título=Seminal CD38 human sperm capacitation through its interaction with CD31|apellidos=Kim|nombre=Byung-Ju|fecha=2015|publicación=Plos One|fechaacceso=23 de junio de 2020|pmid=26407101|doi=10.1371/journal.pone.0139110|apellidos2=Park|nombre2=Dae-Ryoung|nombre3=Tae-Sik|apellidos3=Nam|apellidos4=Seo Ho|nombre4=Lee|apellidos5=Uh-Hyun|nombre5=Kim|volumen=10|número=9}}</ref><ref>{{Cita publicación|url=https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0015028297005360|título=Sperm Deoxyribonucleic Acid Fragmentation Is Increased in Poor-Quality Semen Samples and Correlates With Failed Fertilization in Intracytoplasmic Sperm Injection|apellidos=Lopes|nombre=S.|apellidos2=Jurisicova|nombre2=A.|fecha=Marzo de 1998|publicación=Fertility and Sterility|volumen=69|páginas=528-32|fechaacceso=23 de junio de 2020|doi=10.1016/s0015-0282(97)00536-0|pmid=|apellidos3=Sun|nombre3=J. G.|apellidos4=Meriano|nombre4=J.|apellidos5=Casper|nombre5=R. F.|año=|enlaceautor=|número=3}}</ref><ref>{{Cita publicación|url=https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2056015/|título=Sperm Preparation Techniques and Iatrogenic Failures of In-Vitro Fertilization|apellidos=Mortimer|nombre=D.|fecha=Febrero de 1991|publicación=Hum Reprod|volumen=6|páginas=173 - 176|fechaacceso=23 de junio de 2020|doi=10.1093/oxfordjournals.humrep.a137300|pmid=2056015|apellidos2=|nombre2=|número=2}}</ref>.

En conclusión, la '''manipulación de los gametos los afecta''' a todos ellos cuando se emplean técnicas para separar las poblaciones de esperma de baja calidad de las de mayor calidad. 

De hecho, estas técnicas se han '''refinado''' para '''afectar''' al esperma lo '''menos posible''', pero este menor impacto no equivale a cero impacto negativo.

== Otras voces ==
* [[Fecundación in vitro]]
* [[Inseminación artificial]]
* [[Manipulación de óvulos en ART]]

[[Categoría:Fecundación artificial]]

== Referencias ==
<references />